生物制药论文开题报告

时间:2022-12-04 10:12:06 开题报告 我要投稿
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  一、研究背景

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  20世纪初才在我国大量栽培。洋葱中含有丰富的黄酮类化合物,而黄酮类化合物在医药和食品中有着广泛的应用。黄酮类化合物具有抗癌、抗心血管老化、抗炎、杀菌及降血压等作用。有报道说,洋葱中主要的类黄酮是黄酮醇懈皮素及其衍生物,其含量达总黄酮含量的80%以上,由于含有酚烃基结构而具有较强的抗氧化作用,许多药理学研究表明,懈皮素具有比其它类类黄酮更强的抗氧化性、清除自由基活性、抑制脂肪氧合酶和环氧化物酶,防止血小板凝集的作用。由于洋葱具有多种保健功能特性,其精深加工产品蕴涵着巨大的市场。因此,对洋葱的深入研究将会为降血糖、降血脂、抗血栓、抗菌抗癌等天然药物的开发利用提供新的线索。

  目前对洋葱的研究主要集中在含硫化合物上,而对其黄酮类化合物提取、应用开发技术方面的研究报道甚少目前,国内也几乎没有真正意义上的洋葱深加工产品,其加工水平和产品处于脱水等较低水平。例如:洋葱干和洋葱粉,以及洋葱沙拉酱等。而在发达国家开发出洋葱黄酮胶囊、洋葱方便食品等多种既具较强保健功能又方便、营养可口的深加工产品。因此通过高新技术应用和提取工艺的优化从洋葱中提取黄酮类化合物,能够提高原料的利用率,提高产品的附加值,有利于经济效益的提高。我国加入WTO后,因包括劳动力在内的生产要素低廉,所以洋葱等原料在国际贸易中具有明显的外贸比较优势。多年来中国洋葱产业主要以原料或初级加工产品面向国际市场。目前,我国洋葱及其制品的生产和销售受到三个方面的制约:第一,原料形式出口和销售受市场因素制约较大,且价格较低,附加值低;第二,应用领域不宽,出口价格波动较大,导致产品积压,同时又反过来影响了种植和加工;第三,加工品种类型单一,销售一市场单一。以上三方面的影响导致其价格不稳定,收入不稳定,极大地影响了我国洋葱产业的发展。尤其是洋葱产业普遍存在产品结构不合理、品种单一、生产上艺水平低、呈现主要药理功能作用的风味物质提取率及在产品中的含量低的缺点,难以创造高技术含量、高附加的适应市场需求的新产品,严重影响了产业的进一步发展。而洋葱高品质、高价值的贸易品越来越受到食品工业的推崇,在国外发展迅速,己逐渐成为食品工业的主要原料之一,这些在我国则刚刚起步。我国面临全面与国际接轨后更加激烈的国际竞争,这迫切需要洋葱产业要有较大的发展。我们必须积极增加人力资本和技术投入,不断增加知识产品的生产,依靠洋葱原料外贸比较优势构建我们的产品竞争力。

  通过本实验的研究,一、可以为充分有效开发和利用洋葱功能性成分奠定基础、提供必要的依据。洋葱的深加工和功能食品的研究开发要建立在其功能性成分深入细致的研究基础上。而国内外虽在这方面做了很多工作,但仍有很多需要进一步研究和实验的内容。通过本实验研究期望能在这一方面有所贡献。二、提高洋葱的附加值,为广大种植户带去更多的实惠。开发洋葱深加工产品,为培植洋葱育种→种植→贮藏→运输→深加工→包装→营销的产业链,带动和发展一方产业。在提高洋葱附加值和经济效益的同时带来社会效益,为广大农民种植户提供发家致富的机会。是解决三农问题,寻求长期切实可行、行之有效的方法和途径。三、有利于产业结构的调整。利用丰富的原料资源,发挥中国生产成本相对较低的优势,开发出适合国际市场所需的深加工产品,完全有可能成为出口创汇的渠道。从而改变我国农产品依赖于原料出口的现状。

  二、该选题的研究现状及发展趋势

  洋葱品质优良、营养丰富、易于生产管理,作为天然的保健营养食品,一直受到人们的青睐。洋葱由外国引入我国,因此我国对洋葱栽培的时间相对来说并不算长,但是尽管如此,由于洋葱适应性强,又耐贮藏和运输,而我国自然条件十分有利于洋葱的生长,所以,在我国种植历史虽然短,但发展速度很快,现如今它已经成为我国栽培面积大、栽培范围广、产量最高的蔬菜之一。

  洋葱同生姜、大蒜一样,都是亚洲国家传统的药食两用植物,含有多种生理活性成分,在保健和预防、治疗慢性病等方面具有多种功效。近年来,随着人们对自身保健意识的增强,日益强调食品原料及添加剂的天然性、功能性,使得人们更加关注洋葱的药食兼用特性,期望提取、富集其生理活性成分,更好的满足人们的需要。

  洋葱中含有丰富的黄酮类化合物,而黄酮类化合物化合物的生理活性作用较为广泛,具有抗癌、镇痛、提高免疫能力等药用保健功能。在临床上,可以用来预防和治疗脑动脉硬化及脑血管循环不顺畅等疾病。由于注意到洋葱中类黄酮的含量较高,而且类黄酮种类为具有广泛生理活性的皮素及其糖甙,美国、日本以及欧洲一些国家对洋葱中类黄酮的研究非常重视。而国内对洋葱的研究主要集中在含硫化合物上,黄酮类化合物、前列腺素类和氨基酸类等的药理研究还有待进一步的研究。目前国内外主要是从银杏叶、大豆、山植叶、荷叶、芹菜叶、水芹、花生壳等材料中利用有机溶剂、超声波、酶解等方法提取类黄酮化合物,为了进一步提高类黄酮的质量,将类黄酮产品推向广阔的市场,有必要寻求更多的原料及合适的提取方法以及研究最佳的提取工艺条件。

  三、主要研究内容及预期目标

  主要研究内容

  回流法提取洋葱皮总黄酮的工艺流程如下:

  洋葱皮洗净→烘干粉碎(过60目筛) →回流提取→提取液→抽滤→离心→总黄酮粗提液→真空干燥→黄酮粗品

  1.洋葱中总黄酮提取液的定性检测:通过盐酸一镁粉还原反应、金属盐类试剂的络合反应、提取液与浓硫酸的反应以及与NaOH水溶液的反应等颜色反应确定洋葱提取物中确实含有黄酮,

  2.洋葱中总黄酮提取液的定量检测:通过芦丁-分光光度法测定洋葱中总黄酮含量。产品中黄酮得率可由下式计算,黄酮得率E(%)为:

  式中: c一洋葱皮总黄酮提取液的浓度(mg/ml)

  V一洋葱皮总黄酮提取液的体积(ml)

  N一稀释倍数

  M一原料质量(g)

  3.粉碎粒度对黄酮得率的影响: 准确称取粒度为20目、40目、60目、80目的洋葱粉末各1g,分别加入80%的乙醇溶液20ml,在70℃温度下一次回流提取2h,二次回流提取lh,合并提取液并抽滤,滤得清液在500Or/min条件下离心8min,然后定容于5Oml容量瓶中。分别准确吸取lml样液,按建立标准曲线的方法进行吸光度A的测定,从而得出黄酮类化合物的得率。

  4.乙醇浓度对黄酮得率的影响: 准确称取 1g60目的洋葱粉末5份,分别加入浓度为50%、60%、70%、80%、95%的乙醇溶液20ml,在70℃温度下一次回流提取2h,二次回流lh,合并提取液并抽滤,滤得清液在5000r/min条件下离心smin,然后定容于50ml容量瓶中。分别准确吸取lml样液,按建立标准曲线的方法进行吸光度A的测定,从而得出黄酮类化合物的得率。

  5.料液比对黄酮得率的影响:准确称取1g60目的洋葱粉末5份,分别按料液比(洋葱粉末g:溶剂体积ml)1:10、l:15、l:20、1:25、l:30加入70%的乙醇溶液,在70℃温度下一次回流提取2h,二次回流lh,合并提取液并抽滤,滤得清液在5O00r/min条件下离心8min,然后定容于50ml容量瓶中。分别准确吸取lml样液,按建立标准曲线的方法进行吸光度A的测定,从而得出黄酮类化合物的得率。

  6.浸提温度对黄酮得率的影响:准确称取 1g60目的洋葱粉末5份,分别加入70%的乙醇溶液20ml,在50℃、60℃、70℃、80℃、90℃温度下一次回流提取2h,二次回流1h,合并提取液并抽滤,滤得清液在5000r/min条件下离心8min,然后定容至50ml容量瓶中。分别准确吸取lml样液,按建立标准曲线的方法进行吸光度A的测定,从而得出黄酮类化合物的得率。

  7.浸提时间对黄酮得率的影响:准确称取1g60目的洋葱粉末5份,各加入70%乙醇溶液20ml,在70℃温度下一次回流lh、1.5h、2h、2.5h、3h,二次回流lh,合并提取液并滤,滤得清液在5000r/min条件下离心8min,然后定容于50ml容量瓶中分别准确吸取lml样液,按建立标准曲线的方法进行吸光度A的测定,从得出黄酮类化合物的得率。

  8.正交试验设计:为获得较佳的回流法提取洋葱中总黄酮的工艺条件,需要研究各影响因素及其水平组合对提取效果的影响。为此,正交实验是在上述单因素实验基础上进行的,根据单因素实验结果确定正交实验的因素个数及水平情况,最后确定洋葱中总黄酮提取的最佳工艺参数。

  预期目标

  通过实验结果分析各影响因素及其水平对提取效果的影响,并确定洋葱中总黄酮提取的最佳工艺参数,为节省工艺成本,降低能耗和工业化生产的合理化作业提供了有价值的依据。

  四、研究方案

  拟采用的研究方法

  回流法提取洋葱总黄酮实验中,以乙醇—水体系为浸提溶剂,在参考相关文献和前期实验的基础上确定提取次数为2次,且第二次提取时间为lh,在单因素实验中考察粉碎粒度、乙醇浓度、浸提时间(指第一次浸提用的时间)、浸提温度等各因素对黄酮得率的影响,初步找出各个单因素的较好的水平范围。通过单因素实验确定带入正交实验因素及水平,采用正交实验设计,以黄酮得率为评价指标,确定较优的黄酮提取工艺。

  准备工作情况及主要措施

  在老师的悉心指导下,通过查阅图书,期刊,学术论文,及网上资源,了解了洋葱中黄酮类化合物提取的研究现状及方法,进一步深入学习了回流法提取工艺,经过整理筛选制定本次的研究方案,旨在通过实验优化洋葱中黄酮类化合物的提取工艺,为洋葱的深加工提供理论指导以及节省工艺成本,降低能耗和工业化生产的合理化作业提供有价值的依据。

  五、工作进度安排

  20xx.2.1—20xx.2.28 前期准备阶段:确定课题,查阅、搜集、整理相关资料文献,实践考察,明确实验思路并制定实验方案,完成开题报告。

  20xx.3.1—20xx.3.10 实验准备阶段:采购原料洋葱,制备洋葱粉,以及准备实验所需仪器及试剂

  20xx.3.11—20xx.5.15 实验阶段:采用回流法提取洋葱中黄酮类化合物,对洋葱中总黄酮提取液的定性定量检测;分别考察粉碎粒度、乙 醇浓度、料液比、提取温度以及提取时间对黄酮得率的影 响;在上述单因素实验的基础上进行正交实验,确定洋葱中总黄酮提取的最佳工艺参数。

  20xx.5.16—20xx.5.23 结果分析阶段:整理实验数据,分析实验结果并进行讨论。

  20xx.5.24—20xx.6.10 撰写毕业论文,准备毕业答辩。

  六、主要参考文献

  [1] 周长久.蔬菜种质资源概论[M].北京:北京农业大学出版社,1995.195-199.

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  [3] 阮茜,郭勇.类黄酮的药用研究[J].广东药学,1995,l:6-7.

  [4] 刘丽娟,刘银燕,杨晓虹.葱属植物体化合物及黄酮化合物的研究进展[J].中国药学杂志,2000,35(6):367-369.

  [5] 葛毅强,倪元颖,张振华等.新技术在生姜、大蒜、洋葱深加工中的应用[J].中国调味品,2003,8:7-13.

  [6] 刘成梅,游海.天然产物有效成分的分离与应用[M].北京:化学工业出版社,2003:170-240.

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