粉刺灵颗粒的定性定量分析

时间:2018-04-17 论文范文 我要投稿
                                  作者:朱育凤 刘云 张倩 李政 常星洁

【摘要】本文通过对粉刺灵颗粒剂进行定性定量分析。得出结论:定性定量方法结果准确,重现性好,可用于粉刺灵颗粒剂的质量控制。
【关键词】粉刺灵颗粒  丹参酮ⅡA  薄层色谱法  高效液相色谱法
        粉刺灵颗粒剂主要由丹参、补骨脂、大黄、蒲公英、白花蛇舌草等组成,具有清热解毒,活血化瘀之功效,用于治疗痤疮。为了对其制剂进行更好地质量控制,我们采用薄层色谱法对粉刺灵颗粒中的丹参、补骨脂、大黄进行了定性控制,以丹参酮ⅡA为指标成分,应用高效液相色谱法对其进行定量分析,为提高粉刺灵颗粒质量控制标准提供了实验依据,现报道如下。
        1  仪器与试药
        1.1仪器  Agilent 1100高效液相色谱仪;Hypersil C18柱;BP211D 十万分之一电子分析天平);939型全自动薄层制板器;WD-9413A凝胶成像分析仪;101-1A电热鼓风干燥箱;KQ-1000E医用超声波清洗器。
        1.2试药  粉刺灵颗粒剂由江苏省中医院制剂部提供;丹参酮ⅡA,丹参、补骨脂、大黄,对照品及对照药材均购于中国药品生物制品检定所。硅胶G。硅胶H。甲醇为色谱纯;其他试剂均为分析纯。
        2  定性定量分析
        2.1薄层色谱鉴别
        2.1.1丹参的薄层色谱鉴别  取本品粉末5g,加乙醚25ml,超声20min,滤过,滤液蒸干,残渣加乙酸乙酯1ml使溶解,作为供试品溶液。取丹参对照药材1g,同法制成丹参对照药材溶液。另取粉刺灵颗粒剂丹参阴性颗粒5g,同法制成粉刺灵颗粒丹参阴性对照溶液。再取丹参酮IIA对照品,加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(2010版中国药典附录VI B)[1]试验,吸取上述四种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚(60℃~90℃)-乙酸乙酯(4:1)为展开剂,展开,取出,晾干。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;在与对照品色谱相应的位置上,显相同的暗红色斑点。阴性无干扰。
        2.1.2补骨脂的薄层色谱鉴别[2]  取本品粉末5g,加乙酸乙酯20ml,超声15min,滤过,滤液蒸干,残渣加乙酸乙酯1ml使溶解,作为供试品溶液。取补骨脂对照药材1g,同法制成补骨脂对照药材溶液。另取粉刺灵颗粒剂补骨脂阴性颗粒5g,同法制成粉刺灵颗粒剂补骨脂阴性对照溶液。照薄层色谱法(2010版中国药典附录VI B)[1]试验,吸取上述三种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以正己烷-乙酸乙酯(4:1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%氢氧化钠甲醇溶液,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同的两个蓝白色荧光斑点。阴性无干扰。
        2.1.3大黄的薄层色谱鉴别  取本品粉末5g,加甲醇20ml,超声30min,滤过,取滤液5ml,蒸干,残渣加水10ml使溶解,再加盐酸1ml,加热回流30min,立即冷却,用乙醚萃取2次,每次20ml,合并乙醚液,蒸干,残渣加二氯甲烷1ml使溶解,作为供试品溶液。取大黄对照药材1g,同法制成大黄对照药材溶液。另取粉刺灵颗粒剂大黄阴性颗粒5g,同法制成粉刺灵颗粒剂大黄阴性对照溶液。照薄层色谱法(2010版中国药典附录VI B)[1]试验,吸取上述三种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚(30℃~60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同的五个橙黄色荧光主斑点,置氨蒸气中熏后,斑点变成红色。阴性无干扰。       2.2含量测定
        2.2.1色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-水(73:27) 为流动相;柱温为30℃;流速为1ml/min;检测波长为270nm。理论塔板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于2000。
        2.2.2对照品溶液的制备及线性关系考察  精密称取丹参酮ⅡA9.71mg,加甲醇溶解,定容至25ml,再吸取1ml,加甲醇定容至25ml,作为对照品贮备液。吸取5ml贮备液,加甲醇定容至10ml,分别吸取上述溶液3μl、6μl、10μl、15μl、20μl、25μl进样,测定峰面积,以丹参酮ⅡA含量为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,回归方程为:y = 5488.99533 x-4.47379,r≈0.99997,丹参酮ⅡA在0.0233~0.1942μg范围内呈现良好的线性关系。
        2.2.3粉刺灵颗粒丹参酮ⅡA的含量测定  取本品约5g,精密称定,置棕色容量瓶中,精密加入甲醇50ml,称定重量,超声30min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得,进样10μl。
        2.2.4选择性试验  分别取对照品溶液、样品溶液、对照药材溶液、阴性溶液10μl注入高效液相色谱仪,记录色谱图。结果显示,在与对照品色谱峰相应的位置上,供试品溶液出现相同保留时间的色谱峰,丹参酮ⅡA和样品中其他组分色谱峰可达到基线分离,丹参酮ⅡA与其相邻色谱峰的分离度均大于1.5,阴性对照溶液在此保留位置上无色谱峰,表明阴性对照无干扰。
        2.2.5重复性试验  取同一批样品,按“2.2.3”制备6份供试品溶液,测定丹参酮ⅡA的含量,结果RSD≈0.04%(n=6)。
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