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细胞免疫功能的检测在乙肝诊治中的意义和价值
【摘要】目的 研究乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞的变化及临床意义。方法 采用流式细胞仪检测108例乙肝患者和40例健康者外周血T淋巴细胞亚群（CD3+、CD4+、CD8+）、NK细胞活性。结果 各临床类型乙肝患者NK细胞活性降低， 与正常组比较差异有显著性（P<0.01）；慢性乙型肝炎、慢性重型乙型肝炎、肝硬化组患者外周血CD3+、CD4+、CD8+均下降，其中慢性重型乙型肝炎外周血CD3+、CD8+与正常组比较差异有显著性（P<0.01），急性乙型肝炎患者外周血T细胞亚群变化不明显（P>0.05）。结论 慢性乙肝患者存在细胞免疫功能紊乱，免疫功能的检测对乙肝的诊断、治疗及预后的判断有着重要意义。【关键词】乙型肝炎 细胞免疫 T淋巴细胞亚群
机体免疫调节功能紊乱是造成乙肝病毒（HBV）致病的重要原因之一。为了探讨乙型肝炎患者机体细胞免疫功能状态，本文检测了108例乙型肝炎患者和40例健康者外周血T淋巴细胞亚群（CD3+、CD4+、CD8+）、NK细胞活性，现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1研究对象 108例病例均为我院2007年11月～2010年8月住院病人，男71例，女37例，年龄18～69岁，平均44.2岁。其中急性乙型肝炎28例、慢性乙型肝炎29例、慢性重型乙型肝炎27例、肝硬化24例，所有病例均符合2000年西安会议修订的病毒性肝炎防治方案诊断分型标准[1]。选择健康献血员40例作为正常对照组。所有病例近半年内未使用免疫调节剂和抗病毒治疗。
1.2实验方法 外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞活性检测采用流式细胞检测技术。具体方法如下：①标本处理：抽取病人外周血2ml于EDTA-K2抗凝管内，6小时内分析；②试剂和仪器：CD3/CD4/CD8三色荧光标记试剂，BD公司提供。仪器为美国Beckman Coulter公司提供的Beckman coulter—3XL流式细胞仪。
1.3统计学方法 结果以均数±标准差(x-±s)表示，组间数据采用方差分析和t检验，p<0.05为差异有显著性，数据处理用SPSS10.0统计软件完成。
2 结果
2.1乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞检测结果 见表1， 各临床类型乙型肝炎患者NK细胞活性降低，与正常组比较差异有显著性（P<0.01），以慢性重型肝炎组下降最明显。慢性乙型肝炎、慢性重型乙型肝炎、肝硬化组患者外周血CD3+、CD4+、CD8+均有不同程度下降，其中慢性重型乙型肝炎外周血CD3+、CD8+下降最明显，与正常组比较差异有显著性（P<0.01）；慢性重型肝炎组CD3+、CD8+与急性、慢性肝炎和肝硬化组比较差异有显著性（P<0.01）。各临床类型组外周血CD4+均下降，但与正常组比较差异无显著性（P>0.05）；急性乙型肝炎患者外周血T细胞亚群与正常组比较无统计学差异（P>0.05）。
表1 乙型肝炎患者T淋巴细胞亚群和NK细胞的活性[ (x-±s)% ]
组别 例数 CD3+ CD4+ CD8+ NK
对照组 40 65.58±10.18 37.46±7.38 27.62±5.46 23.69±9.68
急性肝炎 28 70.56±11.08△★ 36.31±8.80△ 27.36±9.64△ 16.70±10.09﹡
慢性肝炎 29 65.55±8.44△★ 36.24±7.11△ 24.64±7.59△★ 15.36±8.95﹡
慢性重型肝炎 27 56.58±13.80﹡ 36.04±12.41△ 19.33±8.07﹡ 10.33±6.75﹡
肝硬化 24 63.02±13.52﹡★ 31.64±10.46△ 23.65±7.20△★ 17.45±10.87
﹡ 注：与对照组比较，﹡P<0.01，△P>0.05；与慢性重型肝炎比较，★P<0.01。 3 讨论
HBV感染机体后，并不直接损伤肝细胞，而是通过诱导机体免疫间接损伤肝细胞[2]。细胞免疫反应是HBV感染后引起肝细胞损害的主要机制[3]。淋巴细胞是人体主要的免疫细胞，其数量的变化在一定程度上反映了机体的免疫水平。本实验显示，急性乙型肝炎患者外周血T细胞亚群变化不明显，而慢性乙型肝炎、慢性重型乙型肝炎、肝硬化组外周血CD3+、CD4+、CD8+百分率均低于对照组，说明乙型肝炎慢性化的进程和机体免疫功能紊乱有关，慢性乙肝患者普遍存在不同程度的细胞免疫功能低下，其中代表细胞毒性T细胞的CD8+细胞低下是机体无法有效清除病毒，使得病程慢性迁延的主要原因[4]。慢性重型乙型肝炎组CD3+、CD4+、CD8+明显低于其他临床组，其变化与病情严重程度一致，提示外周血T淋巴细胞的变化可作为慢性重型肝炎病情发展、疗效和预后的观察指标。临床不同类型HBV感染者NK细胞百分率明显下降，与正常组比较差异有显著性（P<0.01），尤其慢性重型肝炎下降最明显，与慢性肝炎、肝硬化组比较差异有显著性（P<0.05），由于NK细胞活性下降，导致机体干扰病毒复制和抗感染能力下降，HBV在体内持续存在，导致HBV感染的慢性化，因此NK细胞的减少与乙型肝炎慢性化有密切关系。
慢性乙肝患者存在细胞免疫功能的紊乱，动态观察相应的指标，可了解肝病患者的细胞免疫功能状态，为临床治疗及预后评估提供实验室依据。
参 考 文 献
[1]中华医学会肝病学分会、中华医学会感染病学分会.病毒性肝炎防治方案[J].中华传染病杂志，2001，19（4）：56-62.
[2]王毅娟.外周血T淋巴细胞亚群检测对乙型肝炎患者的意义[J].临床和实验医学杂志，2007，11（8）：333-335.
[3]何英，张云奇，吴润香，等.慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化与病毒复制的关系[J].医学检验，2009，24：11.
[4]张恒辉，郭芳，费然，马慧，丛旭，魏来，陈红松.慢性乙型肝炎患者CD4+CD25+调节性T细胞免疫抑制功能的研究[J].中华医学杂志，National Medical Journal of China，2008，08（6）：285-288.
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