达坂盐湖沉积土壤嗜盐细菌的多样性分析及钠离子输出相关基因的克
·本研究的技术路线 第24-26页
2 新疆达坂盐湖沉积土壤嗜盐细菌的多样性分析 第26-37页
·材料和方法 第26-31页
·样品的采集和处理 第26页
·主要仪器和实验用品 第26页
·菌株和载体 第26页
·培养基 第26-27页
·主要试剂 第27页
·DNA提取试剂 第27页
·电泳相关缓冲液 第27页
·实验方法 第27-31页
·嗜盐菌的定向富集 第27-28页
·总基因组DNA的提取与纯化 第28页
·DNA浓度和纯度的测定 第28页
·PCR反应体系和条件 第28-29页
·PCR产物的纯化 第29页
·连接 第29-30页
·热激感受态的制备 第30页
·热激转化 第30页
·菌落PCR 第30页
·DNA序列测定 第30页
·S rRNA的系统发育分析 第30-31页
·核苷酸序列登录号 第31页
·结果与分析 第31-36页
·总基因组DNA的提取 第31页
·嗜盐富集培养物16S rRNA基因多样性及其系统发育分析 第31-36页
·嗜盐富集培养物16S rRNA基因系列扩增 第31-32页
·嗜盐富集培养物16S rRNA基因克隆文库的构建与多样性分析 第32-36页
·讨论 第36-37页
3 微生物钠离子输出相关基因的克隆与功能研究 第37-55页
·材料与方法 第37-43页
·样品的采集和处理 第37页
·菌株、质粒和引物 第37-38页
·主要仪器和实验用品 第38页
·培养基 第38页
·碱法提取质粒所需主要试剂 第38页
·实验方法 第38-43页
·总基因组DNA提取、纯化及浓度测定 第38页
·总基因组DNA的部分酶切 第38-39页
·载体的酶切和去磷酸化 第39页
·载体与总基因组DNA部分酶切片段的连接 第39-40页
·连接产物纯化 第40页
·电转化感受态细胞的制备 第40-41页
·电激转化 第41页
·质粒的快速检测 第41页
·质粒提取 第41-42页
·钠离子输出相关基因的亚克隆 第42-43页
·基因序列的生物信息学分析 第43页
·重组子在不同条件下的生长能力测试 第43页
·结果和分析 第43-53页
·总基因组DNA的部分酶切 第43-44页
·阳性克隆子的筛选 第44页
·重组质粒携带外源基因的序列分析 第44-51页
·Na~+输出相关基因的亚克隆 第51-52页
·E.coli KNabc/pMDtetR-smrL的耐盐性实验 第52页
·E.coli KNabc/pMDtetR-smrL对碱性pH的抗性 第52-53页
·讨论 第53-55页
结论 第55-56页
参考文献 第56-65页